Dna-Konstruktsioon
DNA-konstruktsioon on kunstlikult konstrueeritud nukleiinhappe segment, mis "siirdatakse" sihtkoesse või -rakkudesse.
See sisaldab sageli DNA-inserti, mis sisaldab huvipakkuvat valku kodeerivat geenijärjestust. DNA insert on subkloonitud molekulaarbioloogiavektorisse.
DNA-konstruktsioon võib ekspresseerida looduslikku valku või takistada teatavate geenide ekspressiooni, ekspresseerides konkurente või inhibiitoreid. See võib ekspresseerida mutantseid valke, näiteks deletsioonimutatsioone või missense-mutatsioone. DNA-konstrukti kasutatakse sageli molekulaarbioloogias makromolekulide, näiteks valkude või RNA üksikasjalikumaks analüüsimiseks.
Molekulaarbioloogilised vektorid
Molekulaarbioloogiline vektor on DNA-molekul, mida kasutatakse vahendina võõra geneetilise materjali ülekandmiseks teise rakku.
Peamised vektorid on plasmiidid, bakteriofaagid ja muud viirused ning kunstlikud kromosoomid. Kõigile muundatud vektoritele on ühine replikatsiooni algupära, multikloonimiskoht ja selekteeritav marker.
Vektor ise on tavaliselt DNA-järjestus, mis koosneb insertist (transgeenist) ja suuremast järjestusest, mis on vektori "selgroog". Selgroog sisaldab bakterite resistentsusgeene bakterites kasvamiseks ja promootoreid organismis ekspressiooniks.
Geneetilist teavet teise rakku ülekandva vektori eesmärk on tavaliselt isoleerida, paljundada või ekspresseerida insert sihtrühmas.
Vektori sisestamist sihtruutu nimetatakse bakterirakkude puhul tavaliselt transformatsiooniks või eukarüootiliste rakkude puhul transfektsiooniks. Viirusvektori sisestamist nimetatakse sageli transduktsiooniks.
Plasmiidi integreerumine peremeesbakterisse on kahte tüüpi: Mitteintegreeruvad plasmiidid replitseeruvad nagu ülemine näide, samas kui episoomid, alumine näide, integreeruvad peremehe kromosoomi.
Küsimused ja vastused
K: Mis on DNA-konstruktsioon?
V: DNA-konstruktsioon on nukleiinhappe segment, mis on kunstlikult konstrueeritud, et seda saaks siirdada sihtkoesse või -rakkudesse.
K: Mida DNA-konstruktsioon sageli sisaldab?
V: DNA-konstruktsioon sisaldab sageli DNA-inserti, mis sisaldab huvipakkuva valgu geenijärjestust.
K: Mis on molekulaarbioloogiline vektor?
V: Molekulaarbioloogiline vektor on vahend, mida kasutatakse DNA-fragmentide ülekandmiseks ühest rakust teise.
K: Kuidas võib DNA-konstruktsioon takistada teatavate geenide ekspressiooni?
V: DNA-konstruktsioon võib ekspresseerida konkurente või inhibiitoreid, mis takistavad teatavate geenide ekspressiooni.
K: Millist tüüpi mutantvalke võib DNA-konstruktsioon ekspresseerida?
V: DNA-konstruktsioon võib ekspresseerida mutantseid valke, näiteks deletsioonimutatsioone või missense-mutatsioone.
K: Mis on DNA-konstruktsiooni kasutamise eesmärk molekulaarbioloogias?
V: DNA-konstruktsiooni kasutamise eesmärk molekulaarbioloogias on analüüsida üksikasjalikumalt makromolekule, näiteks valke või RNAd.
K: Milliseid valke võib DNA-konstruktsioon ekspresseerida?
V: DNA-konstruktsioon võib ekspresseerida metsikut tüüpi valku, mutantvalke või konkurente/inhibiitoreid.
